拟杆菌属实时荧光定量PCR的建立

• 作者: 张薇薇 杨晶艳 杨蕊嘉 王嵬 裴晓方 黄玮
• 来源期刊: 现代预防医学
• 学科: 医学
• 关键词: 拟杆菌属 实时荧光PCR 重组质粒
• 年，卷（期）: 2010,（17）
• 页码范围: 3310-3312
• 分类号: R-331
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立拟杆菌属TaqMan实时荧光定量PCR检测方法,为拟杆菌属的快速检测以及相关研究提供有用的工具.[方法]从GenBank中下载拟杆菌属细菌16S rRNA基因序列并进行同源性比较,选择保守区段进行引物和探针的设计.对反应条件进行优化后,通过重组质粒建立标准曲线,并对建立的方法进行灵敏度、特异性、重复性评价.[结果]所建立的实时荧光定量PCR直线回归方程的决定系数R为0.9957,检测灵敏度达到10'cfu/ml,检测时间不超过2 h,批内与批问5次重复性试验的变异系数CV均在1.19%～2.21%之间.[结论]所建立的拟杆菌属Taq-Man实时荧光PCR具有快速、定量、简便、准确的特点,为临床拟杆菌感染的快速诊断、肠道拟杆菌属的快速计数提供了有力的技术支持.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	裴晓方	四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室	77	537	13.0	17.0
2	张薇薇	四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室	16	90	6.0	9.0
3	黄玮	四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室	11	110	5.0	10.0
4	王嵬		33	121	6.0	9.0
5	杨晶艳	四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室	4	30	4.0	4.0
6	杨蕊嘉	四川大学华西公共卫生学院医学检验教研室	2	15	2.0	2.0