旋毛虫T668基因真核表达载体的构建及其在BHK细胞中的表达

• 作者: 于建立 冯爽 刘国兴 刘明远 吴秀萍 唐斌 王学林 王鑫蕊 白雪 陈根元
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 旋毛虫 T668基因 真核表达 免疫荧光
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 469-472
• 分类号: S852.7
• 语种: 中文

摘要

利用RT-PCR技术从中国河南猪旋毛虫(国际标准虫种编号为ISS534)新生幼虫得到T668基因,并克隆入pEGFP-N1真核表达载体中构建重组质粒,该重组质粒在脂质体介导下转染BHK细胞.EGFP标签证明质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达,Western blotting鉴定,细胞裂解液样品中有1条约77 000的条带,可被绿色荧光抗体及猪感染旋毛虫阳性血清所识别,与预计大小一致,表明成功构建T668-pEGFP-N1真核表达质粒,并在BHK细胞融合表达,表达产物具有抗原性.