人p54nrb基因真核表达载体的构建及其在HepG2细胞内的表达

• 作者: 吴嫦丽 张秀娟 牛伢 闫吕彬 陈春玲
• 来源期刊: 广东医科大学学报
• 关键词: p54nrb 载体 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2019,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 615-618
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人54 kDa核DNA、RNA结合蛋白(p54nrb)基因真核表达载体,并观察该载体在人HepG2肝癌细胞内的表达和定位.方法 提取人HepG2肝癌细胞总RNA,RT-PCR扩增人p54nrb基因的蛋白编码序列;采用基因重组技术将该段基因序列亚克隆至pcDNA3-HA真核表达载体中,质粒酶切鉴定和DNA测序证明所构建pcDNA3-p54nrb-HA质粒正确后,将该载体瞬时转染至HepG2细胞,通过细胞免疫荧光方法观察p54nrb在细胞内的表达.结果 酶切和DNA测序结果证明所构建pcDNA3-p54nrb-HA质粒正确;细胞免疫荧光实验可见p54nrb主要表达于HepG2细胞的细胞核.结论 成功构建了人p54nrb真核表达载体,p54nrb主要表达于细胞核.该质粒的构建为后续研究p54nrb基因功能提供了重要载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴嫦丽	广东医科大学生理学教研室	6	3	1.0	1.0
2	陈春玲	广东医科大学生理学教研室	6	3	1.0	1.0
3	张秀娟	广东医科大学生理学教研室	8	6	2.0	2.0
4	牛伢	广东医科大学生理学教研室	1	0	0.0	0.0