人源性bFGF单链抗体的筛选、表达及鉴定

• 作者: 向军俭 周丽君 王宏 邓宁 陶俊
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体展示 抗体库 bFGF 人源性抗体 单链抗体
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 所属期刊栏目: 检测技术
• 页码范围: 674-677
• 分类号: R4
• 字数: 3966字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2010.07.022

摘要

目的 用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)筛选大容量人源噬菌体抗体库,获得能与bFGF特异性结合的人源性单链抗体(scFv).方法 用rhbFGF对大容量人源噬菌体抗体库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"筛选,并通过phage ELISA法对随机挑选的克隆进行抗原结合活性测定,得到的阳性克隆进一步进行原核可溶性表达及鉴定.结果 从104个随机挑选的克隆中,筛得39株抗bFGF的抗体,通过对抗体可变区基因进行多样性分析,发现存在8种不同抗体可变区基因,挑选其中8株phage ELISA显色最高的克隆进行酶切和测序鉴定,发现其中7株为正确的抗体基因序列,通过大肠杆菌成功的进行了scFv的可溶性表达,通过竞争ELISA发现其中一株scFv能够抑制bFGF与其高亲和力受体FGFR1βⅢC的结合.结论 通过筛选噬菌体抗体库获得到7株抗bFGF特异性抗体,其中一株抗体能够抑制bFGF与其高亲和力受体FGFR1的结合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宏	暨南大学生命科学技术学院抗体工程中心	52	320	11.0	16.0
2	向军俭	暨南大学生命科学技术学院抗体工程中心	121	1163	18.0	26.0
3	邓宁	暨南大学生命科学技术学院抗体工程中心	60	325	11.0	15.0
4	周丽君	解放军海军总医院中心实验科	5	13	2.0	3.0
5	陶俊	南方医科大学基础医学院免疫教研室	1	0	0.0	0.0