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SOD1真核表达载体的构建及表达
SOD1真核表达载体的构建及表达
作者:
吴雄辉
孙虹
邢晓为
黄利华
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
铜锌超氧化物歧化酶
载体构建
基因转染
基因表达
基因治疗
摘要:
目的:构建人铜锌超氧化物歧化酶(SOD1)基因真核表达载体,并在HeLa细胞中进行表达.方法:应用RT-PCR从人外周血中扩增SOD1基因开放阅读框(ORF),采用TA克隆技术,将目的片段插入到pUCm-T载体中进行鉴定,重组的质粒命名为pUCm-T-SOD1.随后,将SOD1进一步克隆到真核表达载体pTracer-CMV/Bsd中.用脂质体将经过测序、验证的重组pTracer-CMV/Basd-SOD1质粒转染HeLa细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,转染HeLa细胞,经杀稻瘟菌素(Blasticidin)筛选4周,用RT-PCR、Western blot检测SOD1的表达.结果:成功构建了pTracer-CMV/Bsd-SOD1真核表达质粒,转染HeLa细胞,发现转染成功的细胞均发绿色荧光;RT-PCR及Western blot检测结果表明,所转染的SOD1在HeLa细胞中成功表达.结论:成功构建了能够同时表达绿色荧光蛋白和SOD1的真核表达质粒pTracer-CMV/Bsd-SOD1,为进一步研究SOD1在基因治疗中的作用奠定了基础.
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文献信息
篇名
SOD1真核表达载体的构建及表达
来源期刊
细胞与分子免疫学杂志
学科
医学
关键词
铜锌超氧化物歧化酶
载体构建
基因转染
基因表达
基因治疗
年,卷(期)
2010,(10)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
962-965
页数
分类号
R392.9
字数
语种
中文
DOI
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
邢晓为
中南大学湘雅三医院医学实验中心
60
303
8.0
13.0
2
孙虹
中南大学湘雅三医院耳鼻咽喉头颈外科
123
871
14.0
19.0
3
黄利华
中南大学湘雅三医院医学实验中心
39
99
5.0
8.0
4
吴雄辉
中南大学湘雅三医院耳鼻咽喉头颈外科
3
20
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传播情况
被引次数趋势
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引证文献(0)
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研究主题发展历程
节点文献
铜锌超氧化物歧化酶
载体构建
基因转染
基因表达
基因治疗
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
细胞与分子免疫学杂志
主办单位:
陕西省免疫学会
中国免疫学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1007-8738
CN:
61-1304/R
开本:
大16开
出版地:
西安市长乐西路169号
邮发代号:
52-184
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
7013
总下载数(次)
22
总被引数(次)
39763
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细胞与分子免疫学杂志2010年第7期
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细胞与分子免疫学杂志2010年第5期
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细胞与分子免疫学杂志2010年第2期
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细胞与分子免疫学杂志2010年第11期
细胞与分子免疫学杂志2010年第10期
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