人ST3Gal Ⅰ基因真核表达载体的构建与表达

• 作者: 刘吉成 岳丽玲 崔红霞
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: α2,3唾液酸转移酶Ⅰ 增强型绿色荧光蛋白 转染 表达
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 30-33,136
• 分类号: R3
• 字数: 3303字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-548X.2010.10.012

摘要

目的 构建增强型绿色荧光蛋白为报告基因的pEGFP-N1-ST3Gal Ⅰ真核表达载体,分析其在人乳腺癌细胞系MCF-7中的表达,筛选稳转细胞株,为进一步研究乳腺癌细胞膜连α2,3唾液酸与转移潜能调控提供细胞模型.方法 采用RT-PCR扩增ST3Gal Ⅰ全长基因片段,克隆至pEGFP-N1载体进行测序分析,用脂质体将重组真核表达载体pEGFP-N1-ST3Gal Ⅰ转染人乳腺癌细胞MCF-7中,经荧光显微镜观察及RT-PCR检测hST3Gal I的表达,G418抗性筛选稳转细胞株.结果 成功构建了真核表达载体pEGFP-N1- ST3Gal Ⅰ,体外转染MCF-7细胞后,荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白的表达,半定量RT-PCR检出高水平表达的hST3Gal Ⅰ,获得稳转细胞株.结论 成功构建了增强型绿色荧光蛋白为报告基因的hST3Gal I真核表达载体,并在MCF-7中稳定表达, 为进一步研究乳腺癌细胞膜连α2,3唾液酸水平增高与其侵袭和转移潜能的调控提供实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘吉成	黑龙江省齐齐哈尔医学院药物研究所	5	32	3.0	5.0
2	岳丽玲	黑龙江省齐齐哈尔医学院药物研究所	4	6	2.0	2.0