布鲁菌BMEI1829基因的原核表达、蛋白纯化及动物免疫试验

• 作者: 姜德玉 朱亮 李培锋 段越强 王希良 赵晓燕 高啸
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 布鲁菌 BMEI1829基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 页码范围: 5-9
• 分类号: S852.614
• 字数: 3385字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2010.10.002

摘要

利用PSORTb及CELLO生物学软件对布鲁菌16M菌株基因组序列进行分析,预测其外膜蛋白基因序列;选取BMEI1829基因进行PCR扩增并与原核表达载体pET32a(+)连接,转入E.coli BL21(DE3)感受态细胞;IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE分析及Western blot鉴定目的蛋白的表达;经HisTrapTMHP纯化,免疫Balb/c小鼠,间接ELISA法检测特异性抗体.结果表明,BMEI1829蛋白在原核表达系统中成功表达,纯化后蛋白免疫Balb/c小鼠可产生特异性抗体,抗体亚型分布以IgG1、IgG2b为主,为进一步研究其功能奠定了基础.