pDsRed-hAPJ质粒载体构建及在人HEK293细胞中的表达

• 作者: 刘海青 李雅林 杜辉 白波 陈京
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 载体构建 G蛋白偶联受体 apelin受体 红色荧光蛋白 基因表达
• 年，卷（期）: 2010,（50）
• 页码范围: 9489-9492
• 分类号: R318
• 字数: 1922字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2010.50.043

摘要

背景:Apelin/APJ系统具有广泛的生理作用,但其在细胞内信号转导,特别是apelin受体的脱敏,内化、复敏降解等方面仍无一致性见解.目的:构建人apelin受体APJ与红色荧光蛋白pDsRED-express-C1融合的真核表达载体并检测其在人胚胎肾293细胞中的表达.方法:以质粒pcDNA3.1-hAPJ为模板,扩增人APJ,用EcoR I和BamH I分别酶切扩增的产物和pDsRED-express-C1载体,常规连接、转化感受态大肠杆菌TOP10.提取质粒,进行酶切鉴定,最后进行测序.将测序正确的重组载体用脂质体法转染,PI染色,激光共聚焦显微镜观察.结果与结论:PCR扩增出约1.2 kb的片段,与预期的人APJ大小序列相符,酶切结果显示重组质粒被切成2条片段,其中一条为pDsRED载体大小,另一条为目的片段大小.共聚焦显微观察显示APJ主要表达在细胞膜上.说明实验成功构建了pDsRed-hAPJ真核重组质粒,此表达载体为研究人APJ的亚细胞区域的位移、内吞定位提供了重要的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李雅林	泰山医学院神经生物学研究所	29	112	6.0	8.0
2	杜辉	泰山医学院神经生物学研究所	16	46	4.0	6.0
6	陈京	济宁医学院神经生物学研究所	49	165	7.0	9.0
7	白波	济宁医学院神经生物学研究所	96	380	9.0	12.0
8	刘海青	泰山医学院神经生物学研究所	16	76	5.0	8.0