A组轮状病毒多个结构蛋白抗原表位的串联表达及其免疫原性的检测

• 作者: 张又 方荣祥 李霞 杨慧 杨艳梅 钱渊 陈晓英 霍岩
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 轮状病毒 基因工程疫苗 多价抗原表位
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 60-66
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1206.2010.00312

摘要

从北京腹泻婴儿粪便提取的轮状病毒(rotavirus,RV)(T114株)的RNA中,克隆到轮状病毒结构蛋白基因vp4,vp6和vp7的全长cDNA,对它们编码的蛋白质序列和可能的抗原表位肽进行了预测,选择了RV主要抗原蛋白VF7、VP6和VP4的4个抗原表位肽,通过人工合成DNA的方式将这些抗原表位肽基因串联融合成一个阅读框RME(rotaviras multiple epitopes,RME)并构建原核表达载体.大肠杆菌表达的RME在ELISA反应中可被RV多克隆抗体识别,纯化的RME蛋白注射免疫小鼠可诱导特异性免疫应答,产生高滴度的同源氨基酸序列特异抗体和人RV抗体,其中针对RME的IgG抗体滴度达到1:40 000,针对单个抗原表位EV7、EV6和EV4的IgG抗体滴度达1:10 000～1:20 000,针对RV、Wa株的IgG抗体滴度较低为1:2 500,但能特异地中和该病毒对MAC145细胞的侵染.上述结果为新型RV基因工程疫苗的研发提供了论据和基础.