结核杆菌H37Rv株重组PstS1蛋白的表达纯化及其免疫反应性分析

• 作者: 宋广忠 李召东 泮结超 漏磊君 石君帆
• 来源期刊: 中国预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Psts1 亲和层析 亚细胞定位 结核
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 307-310
• 页数: 4页
• 分类号: R521
• 语种: 中文

摘要

目的:表达、纯化结核杆菌H37Rv株重组Psts1(简称rPstS1)蛋白,为结核病血清学诊断价值研究及亚单位疫苗研制提供物质基础.方法:重组质粒pET15b-Pstsl转化大肠埃希菌表达菌株BL21(DE3)plysE,IPTG诱导rPstSI蛋白表达.经SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定后,优化表达条件,用镍离子鳌合亲和层析柱纯化rPstsl蛋白,并用斑点金免疫渗滤法评价纯化蛋白的免疫反应性.结果成功构建了重组质粒pET15b-Psts1,相对分子质量为38×103的rPstSI蛋白约有30%以可溶性蛋白形式表达,经亲和层析后的rPsts1蛋白纯度为94.8%,有较好的免疫反应性.结论:构建的重组质粒pET15b-PstS1能高效表达有免疫反应性的rPstS1蛋白,经亲和层析后可得到高纯度的纯化蛋白.