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摘要:
巨噬细胞天然抗性蛋白1 (NRAMP1)可抑制结核分枝杆菌(Mycobacterium)和布氏杆菌(Brucella)等多种胞内寄生病原菌的感染,提高动物机体的抗病能力.本研究从秦川牛脾脏中克隆了NRA MP1基因的一种可变剪接体NRA MPI-ISO,序列分析表明,NRA MPI-ISO比NRAMP1多了第3个内含子,从而导致编码序列提前终止于第3个内含子,NRA MPI-ISO编码200个氨基酸.为了探索可变剪接体NRAMPI-ISO的表达情况,本研究分别构建了原核表达载体pET-41-NRA MPI-ISO和真核表达载体pEGFP-NRA MPI-ISO.原核表达载体pET-41 -NRA MPI-ISO可在不同浓度的IPTG诱导下在大肠杆菌BL21中高效表达.真核表达载体pEGFP-NRA MPI-ISO转染牛成纤维细胞后,EGFP-NRAMP 1-ISO融合蛋白分布在细胞核和细胞质中,而正常的NRAMP1蛋白只分布在细胞质的溶酶体膜周围.半定量RT-PCR检测表明,NRA MPI-ISO基因在心、脾脏、肺脏等组织有较高的表达,而在脑、胰、生殖嵴中的表达量相对较低.本研究为进一步研究NRA MPI-ISO基因生物学功能提供了重要信息.
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文献信息
篇名 牛巨噬细胞天然抗性蛋白Ⅰ基因可变剪接体(NRAMPI-ISO)的克隆及在细胞和组织中的表达
来源期刊 农业生物技术学报 学科 农学
关键词 巨噬细胞天然抗性蛋白1(NRAMP1) 可变剪接 分子克隆 载体构建 组织表达
年,卷(期) 2011,(4) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 685-691
页数 分类号 S823|Q78
字数 4807字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.04.013
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 程祥 西北农林科技大学动物医学院 2 2 1.0 1.0
2 王华岩 西北农林科技大学动物医学院 21 67 5.0 7.0
3 邓捷 西北农林科技大学动物医学院 2 8 1.0 2.0
4 孟书燕 西北农林科技大学动物医学院 1 1 1.0 1.0
5 来威锋 西北农林科技大学动物医学院 1 1 1.0 1.0
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巨噬细胞天然抗性蛋白1(NRAMP1)
可变剪接
分子克隆
载体构建
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11-3342/S
大16开
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1993
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