GATA2分子RNAi慢病毒颗粒的包装制备及表达研究

• 作者: 李长燕 杨晓明 汪思应 蒋易楠 詹轶群
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: GATA2转录因子 RNA干扰 慢病毒属 遗传载体
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 843-846
• 分类号: R363.2|R373.9|R341
• 字数: 2391字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-1492.2011.09.001

摘要

目的 制备GATA2分子慢病毒干涉颗粒,建立GATA2表达下调的K562稳定细胞系.方法 采用第3代慢病毒包装系统,将携带特异性干涉GATA2的DNA序列克隆入穿梭质粒PsicoR中,转染K562细胞,Western blot法检测对内源性GATA2干涉效果.在脂质体介导下,siGATA2质粒同包装质粒plP1、plP2、pl/VSVG 共同转染HEK 293T细胞,获得慢病毒干涉颗粒,感染K562细胞,检测干涉效果.结果 构建的重组质粒经酶切,测序鉴定结果 正确,并有干涉效果.该重组质粒与包装质粒共同转染HEK293T细胞,获得干涉慢病毒并利用该病毒建立稳定表达的siGATA2-K562细胞系,经Western blot鉴定,稳定细胞系的内源性GATA2表达下调.结论 成功制备siGATA2干涉病毒颗粒并构建siGATA2-K562稳定细胞系,为后续实验奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨晓明	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	88	536	11.0	19.0
2	詹轶群	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	36	155	5.0	11.0
3	汪思应	安徽医科大学病理生理学教研室	131	558	11.0	15.0
4	李长燕	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	23	130	5.0	11.0
5	蒋易楠	安徽医科大学病理生理学教研室	1	0	0.0	0.0