基因C型鸭肝炎病毒VP1基因的克隆表达及其多克隆抗体的制备

• 作者: 任建亭 崔言顺 李建亮 李玉峰 赵立娜 马秀丽 黄兵
• 来源期刊: 浙江农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸭肝炎病毒 基因C型 VP1基因 克隆表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 258-262
• 分类号: S858.32
• 字数: 2787字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1524.2011.02.012

摘要

采用RT-PCR方法,扩增基因C型DHV JFX08株的VP1基因,与pMD18-T载体进行连接,构建新型DHV VP1基因克隆重组质粒.然后将VP1基因定向插入到pET-32a(+)表达载体中,筛选原核表达载体pET-32a-VP1,进行IPTG诱导表达.SDS-PAGE电泳分析表明,基因C型DHV-VP1基因可在大肠杆菌中稳定高效的表达.Western-blot检测表明,表达产物可与基因C型DHV阳性血清发生特异性反应.将纯化的重组蛋白免疫4周龄SPF鸡,以纯化的VP1重组蛋白和基因C型DHV全病毒分别包板,制备的抗血清ELISA效价分别可达1∶25 600,1∶51 200,表明该重组蛋白具有良好的免疫原性.