狂犬病毒CVS株G基因和N基因共表达重组腺病毒载体的构建

• 作者: 丁农 张金卫 李江涛 柳纪省 殷相平
• 来源期刊: 浙江农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 狂犬病病毒G基因 N基因 内部核糖体进入位点序列 重组腺病毒
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 489-494
• 分类号: S852.65+5
• 字数: 4469字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1524.2011.03.010

摘要

通过引入内部核糖体进入位点序列,构建狂犬病毒G基因和N基因共表达的腺病毒载体.通过RTPCR方法扩增得到RVG基因、N基因.N基因先亚克隆入pIRES质粒;G基因经Kpn Ⅰ和Mlu Ⅰ,pIRES-N质粒经Mlu Ⅰ、Not Ⅰ双酶切,回收目的基因后与经Kpn Ⅰ和Not Ⅰ双酶切处理的腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,再与pAdEasy-1质粒在BJ5183菌中同源重组产生腺病毒载体质粒.线性化后的重组腺病毒质粒转染293细胞,通过观察报告基因绿色荧光蛋白的表达鉴定重组的腺病毒,RT-PCR法检测狂犬病毒精蛋白和核蛋白基因片段.该重组病毒质粒经酶切鉴定与预期结果一致;转染293细胞后观察到绿色荧光蛋白的表达;RT-PCR法可检测到糖蛋白和核蛋白基因片段.试验成功构建了G和N双基因共表达重组腺病毒载体,为狂犬病活载体疫苗的研制提供了依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李江涛		22	54	5.0	6.0
2	殷相平		7	30	3.0	5.0
3	柳纪省		8	28	3.0	5.0
4	张金卫		23	53	5.0	5.0
5	丁农		22	53	5.0	5.0