单核李斯特菌溶血素蛋白的原核表达及纯化

• 作者: 张云 王珍光 郝秀红 郭建巍 钱扬会 马骢
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单核李斯特菌 溶血素因子 原核细胞 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 263-265,269
• 分类号: R378.99+4|Q78
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达并纯化单核李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)溶血素(Listeriolysin O,LLO)蛋白.方法 用1对LM LLO基因特异性引物从LM基因组DNA中扩增LLO基因,并构建重组原核表达质粒pET-30a(+)/rLLO,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.表达的rLLO蛋白经镍离子金属鳌合柱纯化后,进行SDS-PAGE及质谱分析.结果 重组表达质粒pET-30a(+)/rLLO经PCR、双酶切及测序,证明构建正确.表达的rLLO融合蛋白相对分子质量约为78 000,主要以包涵体形式表达.质谱分析显示,两个相对分子质量分别为35 000和45 000的小分子也均为LLO蛋白.结论 已成功地在大肠杆菌中表达了rLL0蛋白,并进行了纯化,为进一步研究LLO蛋白的生物学功能及研制基于LLO蛋白的特异性诊断制剂奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭建巍	海军总医院检验科	56	244	9.0	12.0
2	马骢	海军总医院检验科	98	534	12.0	17.0
3	钱扬会	海军总医院检验科	27	101	6.0	8.0
4	郝秀红	海军总医院检验科	74	450	10.0	16.0
5	张云	海军总医院检验科	19	85	5.0	8.0
6	王珍光	海军总医院检验科	20	141	7.0	11.0