单增李斯特菌Hly基因的原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 宋亮 左伟勇 洪伟鸣
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 单增李斯特菌 LLO蛋白 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2017,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术与工程
• 页码范围: 175-181
• 页数: 7页
• 分类号: Q939.14+9
• 字数: 5456字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13836/j.jjau.2017023

摘要

为获得单增李斯特菌溶血素(Listeriolysiono,LLO)蛋白及其多克隆抗体.根据单增李斯特菌溶血素蛋白的基因Hly序列设计了一对特异性引物,扩增出Hly基因,克隆入原核表达载体pET-32a,并转化于大肠杆菌BL21中,在诱导剂IPTG的作用下重组LLO蛋白成功表达.SDS-PAGE结果表明重组蛋白分子量约为69.3 ku,且主要以包涵体形式表达LLO蛋白.将重组蛋白纯化后免疫新西兰大白兔,获得兔抗LLO抗体.Western-blot检测到一条约69.3 ku的特异性条带,表明该抗体具有较强的特异性.单增李斯特菌溶血素基因Hly在大肠杆菌中已成功表达,且制备的多克隆抗体可用于LLO蛋白的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	洪伟鸣	江苏农牧科技职业学院江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室	20	35	3.0	5.0
2	宋亮	江苏农牧科技职业学院江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室	9	7	2.0	2.0
3	左伟勇	江苏农牧科技职业学院江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室	29	46	3.0	5.0