单核细胞增生性李斯特氏菌溶血素基因克隆及原核表达载体构建

• 作者: 任艳红 李一经 王新生
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单核细胞增生性李斯特氏菌 溶血素基因 克隆与测序 表达载体构建
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 96-99
• 页数: 4页
• 分类号: R378.99
• 字数: 2252字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.02.006

摘要

目的构建单核细胞增生性李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LMO)溶血素基因重组表达质粒.方法本文采用PCR方法扩增出LMO 0586株溶血素(Hemolysin,hly)基因,将其克隆到pMD18-T中,筛选带有插入片段的阳性质粒.经酶切和PCR鉴定,然后进行测序.继而用SalⅠ和XbaⅠ双酶切阳性质粒,目的片段定向插入pPROEXTMHTa中进行鉴定.结果 hly基因体外扩增产物大小约为1646bp.核苷酸序列鉴定后,其核苷酸序列与国外报道的LMO F6789株、LMO F2365株同源性分别为99.70%和99.39%.推导出的氨基酸序列与其相应菌株比较,同源性分别为99.82 %和98.90%.重组表达质粒经PCR及酶切鉴定表明为正确重组子.结论在国内首次克隆到LMO hly全基因,并构建出含hly基因的原核表达载体.此项工作为进一步LMO溶血素基因的表达奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李一经	东北农业大学动物医学院预防兽医学教研室	219	1679	20.0	27.0
2	任艳红	东北农业大学动物医学院预防兽医学教研室	6	71	5.0	6.0
3	王新生		3	17	2.0	3.0