新城疫病毒F48E9株重组NP蛋白单克隆抗体制备及鉴定

• 作者: 刘培欣 刘怀然 刘文丽 孔宪刚 张馨心 陈维多
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 新城疫病毒 F48E9 NP蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 131-135
• 分类号: S852.65+9.5
• 字数: 4481字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9369.2011.09.026

摘要

制备新城疫病毒(NDV)NP蛋白单抗,以期为NDV抗原表位研究及检测方法建立方面奠定基础.利用NDV F48E9,株pET32a-NP重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤细胞技术,问接ELISA筛选,获得了2株稳定分泌抗NP重组蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1G3、4B12.经间接ELISA测定,腹水抗体效价分别为1∶2.56x 105、1∶5.12x105.亚类鉴定结果表明这两株单抗均为IgG1.Western blot分析结果显示,1G3、4B12均能特异性识别重组NP蛋白.与NDV感染细胞经间接免疫荧光试验检测均呈黄绿色荧光.经相加ELISA测定表明两株单抗识别的抗原表位不同.