表面展示猪圆环病毒2型衣壳蛋白的重组杆状病毒的构建

• 作者: 严常燕 叶煜 廖明 林文耀 樊惠英 程晓亮 陈筱薇
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 杆状病毒表面展示系统 猪圆环病毒2型 dCap基因
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学与兽医学
• 页码范围: 96-100
• 分类号: S852.65
• 字数: 3894字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-411X.2011.04.021

摘要

利用PCR方法扩增猪圆环病毒2型核定位信号区缺失的Cap蛋白基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1的gp64信号肽和gp64成熟蛋白之间.将此融合片段亚克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA3.1-gp64-dCap.然后将含有CMV启动子,gp64及dCap的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBac-V,得到重组质粒pFastBac-dCap-V.然后将此转化DH10Bac感受态细胞,获得的重组穿梭质粒Bacmid-dCap-V,经脂质体转染St9细胞,获得重组杆状病毒Ac-dCap-V.该重组病毒感染Sf9细胞后可以产生典型的细胞病变,转导哺乳动物细胞后经间接免疫荧光试验证明,该重组杆状病毒成功转导哺乳动物细胞并表达dCap蛋白.