柔嫩艾美耳球虫表面抗原SAG7基因的克隆与表达

• 作者: 李红炳
• 来源期刊: 云南畜牧兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 柔嫩艾美耳球虫 表面抗原 SAG7 原核表达
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 所属期刊栏目: 禽业科技
• 页码范围: 22-24
• 分类号: S858.312.723
• 字数: 2951字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1341.2011.06.018

摘要

应用RT—PCR方法从柔嫩艾美耳球虫杨陵株的第二代裂殖子总RNA扩增出表面抗原SAG7的基因序列，并将其克隆至pGEM—T easy载体转化DH5a菌中。再用一对特异性引物扩增出N端不含信号肽序列的SAG7基因，经BamHⅠ和胁以Ⅲ双酶切后与同样双酶切的PET-32a（＋）连接并转化大肠埃希氏菌BL21（DE3），用PCR方法和双酶切筛选阳性克隆并测序，验证读码框是否正确。将筛选的阳性克隆菌经IPTG诱导。获得了SAG7重组抗原在大肠埃希氏菌中的高效表达，表达量占菌体总蛋白的50％以上，融合蛋白的分子量约为45kDa。菌体经超声裂解后经SDS—PAGE分析，重组抗原是以包涵体形式存在。’

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李红炳		9	17	2.0	4.0