人GLP -1- IgG Fc融合蛋白在毕赤酵母中的高效表达

• 作者: 梁泉峰 王倚 王圣钧 祁庆生 翟琳 郁慧丽
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 胰高血糖素样肽-1 Fc融合蛋白 巴斯德毕赤酵母菌 高效表达
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 29-33
• 分类号: Q785|Q786
• 字数: 3939字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.04.094

摘要

目的:构建GLP-1-IgG Fc融合蛋白分子并在毕赤酵母中实现高效表达.方法:使用蛋白质工程技术改造GLP -1,去除其蛋白酶降解位点,然后利用重叠延伸PCR方法得到改造后的GLP -1与人IgG-Fc片断的嵌合体基因并将其插入pPIC9K载体中.以重组载体转化巴斯德毕赤酵母菌中进行表达.采用SDS-PAGE和Western Blot方法检测重组蛋白的表达.结果:成功的构建了GLP -1-IgG Fc嵌合体基因并使其在重组毕赤酵母中高效分泌表达.在25℃条件下,摇瓶培养添加0.5％甲醇诱导72h后融合蛋白的表达量最大,为5mg/L.SDS-PAGE和Westem-Blot结果表明表达产物为GLP -1-IgG Fc融合蛋白.结论:获得了高效表达GLP -1-IgG Fc融合蛋白的毕赤酵母菌株,为GLP -1-IgG Fc的活性和半衰期测定及下一步的开发奠定了基础,并为在毕赤酵母菌中表达其他Fc融合蛋白和抗体提供了参考.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁泉峰	山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室	11	28	3.0	5.0
2	王圣钧	山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室	2	13	2.0	2.0
3	郁慧丽	山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
4	翟琳	山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室	1	2	1.0	1.0
5	王倚	山东大学国家糖工程技术研究中心	1	2	1.0	1.0