PRRSV SCQ株M蛋白基因截断片段原核表达及间接ELISA检测方法的初步建立

• 作者: 万莉 余霞 王志彪 陈进会 颜其贵 马磊
• 来源期刊: 检验检疫学刊
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白基因 原核表达 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 页码范围: 26-31
• 页数: 6页
• 分类号: S85

摘要

通过PCR方法从重组质粒pMD18-T-M扩增得到缺失N端跨膜区的M蛋白基因片段dM（de-letingM）,克隆至高效原核表达载体pGEX-4T-1,得到重组M蛋白。以纯化的重组M蛋白作为抗原,建立检测猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体的间接ELISA方法,并确立ELISA最佳工作条件。经重复性试验、交叉试验、阻断试验等试验验证,结果表明该方法重复性好、特异性强、敏感度高;与美国IDEXX公司试剂盒相比较,特异性和敏感性分别为96.3%和93.5%,无显著性差异。用建立的方法检测临床血清样品168份,总阳性率为39.9%。