南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母的表达及学性质研究

• 作者: 卢英华 孙金鹏 敬科举 钱圣一
• 来源期刊: 厦门大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 南极假丝酵母脂肪酶B 毕赤酵母 分泌表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 765-771
• 分类号: Q781
• 字数: 5159字
• 语种: 中文

摘要

为提高南极假丝酵母脂肪酶B( Candida antarctica lipase B,CALB)的表达量,根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子偏好性设计合成CALB基因,插入表达载体pPIC9K构建重组质粒pPIC9K-CALB.重组质粒转化毕赤酵母GS115,经过G418抗性筛选得到多拷贝转化子.摇瓶发酵120 h后上清液酶活力达到46 U/mL,通过金属螯合层析纯化发酵液将CALB纯化了5.23倍,比活力达到856.7 U/rg,去糖基化实验显示重组CALB比野生型CALB大5 ku.实验考察了不同反应温度、pH值和金属离子对重组CALB活性和稳定性的影响,发现重组CALB最适反应温度和pH分别为30℃和6.5,在pH 5.0～8.0之间以及40℃以下有较好稳定性,金属离子(10 mmol/L)Ca2+,Zn2+,Mn2+有助于CALB酶活力的提高,而Cu2+,Ag+,Fe3+强烈抑制酶催化反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	敬科举	厦门大学化学化工学院	18	91	6.0	8.0
2	卢英华	厦门大学化学化工学院	73	723	13.0	23.0
3	孙金鹏	厦门大学化学化工学院	2	14	2.0	2.0
4	钱圣一	厦门大学化学化工学院	1	8	1.0	1.0