南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母中的分泌型表达及酶学性质初探

• 作者: 李迅 王飞 邓若冰
• 来源期刊: 四川师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 南极假丝酵母脂肪酶B 毕赤酵母 分泌表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 基础理论
• 页码范围: 911-916
• 页数: 6页
• 分类号: Q556+.1|Q786
• 字数: 3526字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-8395.2014.06.025

摘要

将南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因克隆到毕赤酵母表达载体pPICZαA(含pAOX1启动子)和pGAPZαA(含pGAP启动子)中,转入毕赤酵母表达宿主KM71H,经三丁酸甘油酯平板活性筛选获得高效表达的酵母工程菌株.分泌型表达CLAB酵母工程菌的酶活较高,经摇瓶发酵96 h后,CLAB活力达到11.1 U/mL.经发酵罐高密度发酵84h后,CLAB活力达到179.2 U/mL,蛋白质量浓度为1.36 mg/mL.体积分数12％SDS-PAGE凝胶电泳显示重组CALB相对分子量为36 kDa.该酶最适温度为40℃,最适pH值为8.0.在pH7.5 ～9.5较稳定,经55℃保温1h,残余酶活还有48.5％.5 mmol/L Mg2+、Ni+、Co2+和体积分数0.10％ SDS对CALB酶活影响很小,而Zn2强烈抑制酶催化反应,体积分数0.05％ Triton X-100对CALB稍有激活作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王飞	南京林业大学化学工程学院	45	244	10.0	13.0
3	李迅	南京林业大学化学工程学院	25	149	6.0	11.0
7	邓若冰	南京林业大学化学工程学院	2	9	2.0	2.0