慢病毒介导RNA干扰HPIP蛋白抑制肿瘤细胞增殖

• 作者: 丁丽华 叶棋浓 张浩 徐小洁 杜楠 杨智洪 王凌雪 范忠义 韩永健 韩聚强
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 造血相关的PBX相互作用蛋白质 RNA干扰 慢病毒 细胞增殖
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 321-324
• 分类号: Q786|R735.7
• 字数: 3370字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2011.03.004

摘要

目的:建立高效稳定的造血相关的PBX相互作用蛋白质(HPIP)小干扰RNA(siRNA)细胞导入方法,检测HPIP的表达对肿瘤细胞生长增殖的影响.方法:构建人HPIP慢病毒siRNA干扰载体,将重组质粒转染人胚肾293T细胞,通过实时定量RT-PCR及Western印迹分析检测Lenti-H1 HPIP siRNA的干扰效果;将Lenti-H1 HPIPsiRNA与4个包装质粒共同转染293T细胞,包装成慢病毒后,感染宫颈癌HeLa和肝癌HepG2细胞,经嘌呤霉素筛选2周后,收集细胞进行Western印迹检测;用结晶紫实验检测其对肿瘤细胞生长增殖的影响.结果:构建的Lenti-H1 HPIP siRNA能有效抑制HPIP的表达;结晶紫实验显示,慢病毒介导的HPIP siRNA导致细胞增殖的显著抑制.结论:慢病毒介导的HPIP敲减能明显抑制肿瘤细胞的增殖,HPIP可能是一个潜在的肿瘤治疗新靶点.