融合型乳酸片球菌素在大肠杆菌中的表达与纯化

• 作者: 孙爱友 宋建民 魏东芝
• 来源期刊: 南京理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 乳酸片球菌素 大肠杆菌 融合蛋白 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 268-272
• 分类号: Q78
• 字数: 3324字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-9830.2011.02.023

摘要

为在大肠杆菌中高效表达乳酸片球菌素(PED),按照美国国立生物技术信息中心公布的PED基因序列设计合成引物,以乳酸片球菌基因组DNA为模板,用多聚酶链式反应扩增PED结构基因特异片段,构建编码组氨酸标记硫氧还原蛋白融合PED的重组表达质粒pET32c-PED,并转化大肠杆菌BL21(DE3).在异丙基硫代半乳糖苷诱导后融合蛋白以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的28%.经镍亲合层析纯化的融合蛋白用肠激酶裂解,再经超滤纯化,可得78%的收率.融合蛋白没有抗粪肠球菌细菌素活性,被分开的PED恢复了抑菌活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏东芝	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	158	1415	22.0	29.0
2	孙爱友	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	6	13	2.0	3.0
3	宋建民	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	4	11	2.0	3.0