FOXL2酵母双杂交诱饵载体构建及检测

• 作者: 任珊珊 唐胜建 张伟 李艳艳 王小柯 韩小波 黄旭东
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: FOXL2 BPES 酵母双杂交
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-10
• 页数: 5页
• 分类号: Q51
• 字数: 4263字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2011.03.062

摘要

目的:用FOXL2编码区片段构建酵母双杂交诱饵质粒并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测.方法:PCR扩增FOXl2编码区DNA片段,克隆入pGBKT7质粒,转化至DH-5α大量扩增后提取质粒,经PCR、酶切和测序验证,再转化至Y187酵母菌株中用缺陷培养基筛选并进行自激活和毒性检测.结果:获得FOXL2基因1137bp片段,并成功将人类正常和一突变型FOXL2编码区克隆人pGBKT7中,经检测在SD/-Trp/X-α-Gal单缺培养基平板上无蓝色菌斑出现,在SD/-Ade/-Trp培养基平板无生长.同时在SD/-Trp/Kana(20μg/ml)培养24h后测得菌液OD600≥0.8,说明重组诱质粒无自激活活性和酵母毒性,满足作为诱饵质粒的条件.结论:成功构建了正常及突变型的FOXL2酵母杂交诱饵质粒;为进一步利用酵母双杂交技术研究与FOXL2相互作用的蛋白打下坚实基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王小柯		15	32	3.0	5.0
2	唐胜建		133	648	13.0	17.0
3	黄旭东		59	163	7.0	10.0
4	张伟		40	199	7.0	13.0
5	韩小波	莒县人民医院骨二科	3	4	1.0	2.0
9	任珊珊		4	10	2.0	3.0
10	李艳艳		8	21	2.0	4.0