杉木ISSR-PCR反应体系的正交优化

• 作者: 储秀云 安静 张玉梅 徐刚标 申响保 谷振军
• 来源期刊: 中南林业科技大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 杉木 ISSR-PCR 正交优化
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 156-159
• 分类号: S791.27
• 字数: 2381字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-923X.2011.03.032

摘要

利用正交设计实验对影响杉木ISSR-PCR扩增的重要因素(Mg2+、dNTP、模板DNA、引物、TaqDNA聚合酶)进行优化,以建立杉木ISSR-PCR反应的最佳体系.结果发现杉木ISSR-PCR最佳反应体系(20μL)为:MgCl2 1.8 mmol/L,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.7 μmol/L,模板DNA 90ng,TaqDNA聚合酶1 U;退火温度为52～55℃.扩增反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,52℃退火40 s,72℃延伸2 min,40个循环;72℃延伸7 min;4℃保存.该反应体系的建立,为杉木种质资源分类、遗传多样性分析提供了更客观可靠的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐刚标	中南林业科技大学生命科学与技术学院	75	755	14.0	24.0
2	申响保	中南林业科技大学生命科学与技术学院	13	278	7.0	13.0
3	张玉梅	中南林业科技大学生命科学与技术学院	6	67	4.0	6.0
4	储秀云	中南林业科技大学生命科学与技术学院	2	14	1.0	2.0
5	谷振军	中南林业科技大学生命科学与技术学院	8	80	5.0	8.0
6	安静	中南林业科技大学生命科学与技术学院	3	27	3.0	3.0