拟南芥硫酯酶基因(atfata)在大肠杆菌中的表达及其对游离脂肪酸合成的影响

• 作者: 刘辉 咸漠 宋秋华 张英伟 杨建明 程涛
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 拟南芥 硫脂酶 工程大肠杆菌 胞外游离脂肪酸
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 568-571
• 页数: 4页
• 分类号: Q939.9|Q78
• 语种: 中文

摘要

硫酯酶催化脂酰ACP(酰基载体蛋白)水解生成游离脂肪酸和ACP载体蛋白,能够解除脂肪酸合成与磷脂合成的偶联,是获得游离脂肪酸的关键基因.将拟南芥的硫酯酶基因atfata克隆到原核表达载体pET30a上,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达了His-tag融合蛋白,经SDS-PAGE检测获得特异性表达条带.对该重组菌株进行摇瓶发酵实验,GC-MS检测表明其与对照菌株脂肪酸组成并未发生变化；但其脂肪酸产量达到232.06 mg/L,比对照菌株提高了70%；同时胞外游离脂肪酸产量达到了33 mg/L,占总脂肪酸含量的15%,是野生菌株胞外脂肪酸产量的7倍.