BMP4-siRNA重组腺病毒的构建及鉴定

• 作者: 孙治君 郭丹 黄佳祎
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: BMP4 siRNA 腺病毒 乳腺癌 骨转移
• 年，卷（期）: 2011,（8）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 922-927
• 分类号: R736.3
• 字数: 3412字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建靶向抑制骨形态发生蛋白BMP4基因RNA的siRNA腺病毒,为进一步研究其在乳腺癌骨转移中的作用打下基础.方法 以PCR扩增获得BMP4全长片段,插入筛选质粒pSOS载体,同时设计6段靶向BMP4基因RNA的干扰片段,分别经酶切、连接及鉴定后获得pSOS-sirBMP4.脂质体转染293细胞,根据荧光表达量筛选获得干扰效率较高的4个干扰片段,插入穿梭质粒pSES-HUS,经重组、HEK-293细胞包装获得BMP4-siRNA腺病毒.感染乳腺癌细胞系MDA-MB-231,RT-PCR、Western blot检测其干扰效率.MTr法检测其对MDA-MB-231细胞增殖的影响.结果 筛选获得4个干扰效率较高的片段,插入穿梭质粒,经重组、包装获得腺病毒pAd-sirBMP4.感染乳腺癌细胞系MDA-MB-231后,明显抑制BMP4的表达并促进MDA-MB-231细胞增殖.结论 成功构建具有较高干扰效率的腺病毒pAd-sirBMP4,为进一步研究BMP4在乳腺癌中的作用打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭丹	重庆医科大学第二附属医院普外科	27	146	7.0	10.0
2	黄佳祎	重庆医科大学基础医学院	16	53	5.0	6.0
3	孙治君	重庆医科大学第二附属医院普外科	67	346	10.0	15.0