抗HBs Fab-IFNα融合蛋白的制备与初步鉴定

• 作者: 叶伟民 宋杰 陆慧琦 韩焕兴
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 免疫球蛋白Fab碎片 干扰素α 肝炎表面抗原,乙型 肝炎病毒,乙型
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 467-470
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

目的 构建抗HBsAg的pComb Fab-IFNα载体,原核表达具双重生物活性的抗HBs Fab-IFNα融合蛋白.方法 以pBAD-Fab和pBAD IFNα作为模板,分别扩增Fd、λ和IENα基因,经相应的限制性内切酶酶切后分3次克隆人pComBHss质粒,转化XL-1 Blue大肠埃希菌.限制性酶切和测序鉴定重组质粒,免疫蛋向印迹(Western blotting)和斑点印迹(Dot blotting)鉴定融合蛋白的表达及抗原结合活性.结果 重组载体的酶切、电泳及测序表明抗HBs Fab-IFNα基因克隆正确.表达产物经12%SDS-PAGE电泳、转印,Western blotting显示该融合蛋白分子量约为65kD,Dot blotting显示其与HBsAg具有结合能力.细胞病变抑制法测定IFNα生物学活性为7.8×104～5.1×105U/ml.结论 该原核系统成功表达了抗HBs Fab-IFNα融合蛋白,表明其既具有抗HBsAg结合能力,又具备IFNα的生物活性,为进一步的系统表达和应用研究提供了条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩焕兴	第二军医大学长征医院实验诊断科	47	148	7.0	10.0
2	陆慧琦	第二军医大学长征医院实验诊断科	38	118	6.0	9.0
3	叶伟民	第二军医大学长征医院实验诊断科	20	98	5.0	9.0
4	宋杰	第二军医大学长征医院实验诊断科	3	5	1.0	2.0