GAPDH基因克隆及其作为毕赤酵母内标物的可靠性研究

• 作者: 唐勇军 张儒 张变玲 李谷才 蒋开军 谢涛
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 生物学
• 关键词: GAPDH 巴斯德毕赤酵母 内参对照 Western blotting
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 174-178
• 分类号: Q94
• 字数: 2862字
• 语种: 中文

摘要

为了测定GAPDH在巴斯德毕赤酵母中作为内参蛋白的有效性,利用PCR鉴定巴斯德毕赤酵母中GAPDH基因,分别在含葡萄糖、甲醇、甘油培养基及不同温度下培养巴斯德毕赤酵母,采用SDS-PAGE,Western blotting和催化活性检测.测序结果与已报道的巴斯德毕赤酵母GAPDH基因完全一致.SDS-PAGE结果显示,表达蛋白分子量为35.4 kD,与预期分子量相符.Western blotting和催化活性测定显示,在葡萄糖诱导下GAPDH表达最高,甲醇次之,甘油最低.37℃下GAPDH表达略高于28℃.在同一诱导物或温度下,GAPDH表达不会随浓度或培养时间发生明显变化.结果表明,在同一种诱导方式下,GAPDH可以作为异源蛋白表达的内参对照.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢涛	湖南工程学院化学化工学院	62	289	9.0	13.0
2	张儒	湖南工程学院化学化工学院	35	154	8.0	11.0
3	蒋开军	湖南工程学院化学化工学院	5	27	2.0	5.0
4	唐勇军	湖南工程学院化学化工学院	8	63	4.0	7.0
5	李谷才	湖南工程学院化学化工学院	26	144	6.0	11.0
6	张变玲	第四军医大学唐都医院疼痛生物医学研究所	1	1	1.0	1.0