高温中性蛋白酶基因的克隆及毕赤酵母表达研究

• 作者: 唐琦勇 张志东 王涛 王玮 茆军 谢玉清
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 高温中性蛋白酶 毕赤酵母 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 页码范围: 635-638
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 2615字
• 语种: 中文

摘要

对地衣芽孢杆菌XJT9503高温中性蛋白酶进行了克隆,并在毕赤酵母中进行了表达.以高温中性蛋白酶产生菌地衣芽孢杆菌XJT9503基因组DNA为模板,通过PCR扩增,获得高温中性蛋白酶(Tnp)基因的特异性片段,大小约为1 kb.通过EcoRI、NotI 双酶切后,将该基因连入毕赤表达载体pPIC9K,并整合到毕赤酵母SMD1168基因组中,构建的基因工程菌,进行甲醇诱导表达.结果表明,基因工程菌发酵72 h,有最大酶活,为19 U/mL;酶的最适作用温度为65℃,与原始酶的最适作用温度相符.证明研究成功克隆了高温中性蛋白酶基因,并在毕赤酵母中正确表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张志东	新疆农科院微生物所	19	219	8.0	14.0
2	谢玉清	新疆农科院微生物所	10	71	4.0	8.0
3	唐琦勇	新疆农科院微生物所	13	118	6.0	10.0
4	茆军	新疆农科院微生物所	18	220	8.0	14.0
5	王玮	新疆农科院微生物所	12	76	5.0	8.0
6	王涛	南京工业大学制药与生命科学学院	41	266	9.0	15.0