犬细小病毒VP2基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达与检测

• 作者: 毕聪明 费东亮 赵刚 陈强
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 犬细小病毒 VP2基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 兽医—研究报告
• 页码范围: 352-355
• 分类号: Q813.1+1
• 字数: 3164字
• 语种: 中文

摘要

为表达犬细小病毒VP2蛋白(CPV VP2),用于犬细小病毒病的诊断、疫苗研制和VP2蛋白功能研究,根据基因库已发表犬细小病毒序列设计合成了VP2基因的1时特异引物,以细小病毒感染的犬粪样品中提取的总DNA为模板.进行PCR扩增,把扩增产物克隆至pMD18-T载体进行测序、鉴定.将克隆的VP2基因片段克隆至原核表达栽体PGEX-6P-1,再将构建成功的原核表达质粒栽体PGEX-6P-VP2转化至大肠杆菌BL21中,进行鉴定、测序、表达.结果表明,克隆的VP2基因片段全长1755 bp,与6个VP2基因序列的同源性为98.7%～99.7%.Western-blotting分析显示,表达产物约为90 kD的融合蛋白,可被犬细小病毒阳性血清所识别,具有良好的反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	费东亮	辽宁医学院畜牧兽医学院	48	134	6.0	8.0
2	赵刚	辽宁医学院畜牧兽医学院	34	156	7.0	10.0
4	毕聪明	辽宁医学院畜牧兽医学院	37	83	5.0	7.0
5	陈强	辽宁医学院畜牧兽医学院	47	150	6.0	9.0