人TGF-β2特异性siRNA质粒的构建

• 作者: 乔芳 伍友春 傅培 张芳婷 李明华 李金瑛
• 来源期刊: 国际眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转化生长因子-β2 siRNA载体 质粒构建
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 实验论著
• 页码范围: 1890-1892
• 分类号: R77
• 字数: 2865字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5123.2011.11.006

摘要

目的:构建人TGF-β2特异性siRNA质粒.方法:从NCBI中查找人TGF-β2的mRNA序列,并利用生物信息学对序列进行分析;根据siRNA的设计原则,选择最佳的siRNA序列;利用限制性内切酶BamH Ⅰ和Bbs Ⅰ将相应的双链DNA插入到GPU6/GFP/Neo载体中;重组质粒经限制性内切酶BamH Ⅰ和Pst Ⅰ单酶切进行鉴定,鉴定正确的质粒进一步通过基因测序的方法进行验证.结果:根据生物信息学选择TGF-β2mRNA的1 016~1 034区域作为干扰位点;重组质粒酶切结果表明双链DNA序列成功插入到了GPU6/GFP/Neo载体中;测序分析结果进一步证明插入序列与设计完全一致.结论:成功构建了人TGF-β2特异性siRNA干扰质粒,为研究TGF-β2基因功能和利用基因治疗的方法提高青光眼滤过手术成功率奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张芳婷	北京大学深圳医院眼科	47	199	8.0	11.0
2	傅培	北京大学深圳医院眼科	30	132	7.0	10.0
3	李金瑛	北京大学深圳医院眼科	40	87	5.0	7.0
4	乔芳	北京大学深圳医院眼科	9	18	3.0	3.0
5	李明华	北京大学深圳医院眼科	21	49	4.0	6.0
6	伍友春	北京大学深圳医院眼科	17	90	6.0	9.0