猪瘟病毒E2基因主要抗原区的克隆及其原核表达

• 作者: 沈志强 王金良 管宇 苗立中 董林 谢金文 高三阳
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（上半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 E2蛋白 克隆 原核表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 10-13
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

为研究猪瘟病毒E2蛋白的抗原表位在机体免疫应答中的作用和特点,试验参照猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV)的基因组序列,设计、合成了1对引物,应用RT - PCR方法扩增出长为786 bp的基因片段,命名为zE2,将zE2基因克隆到原核表达质粒pET 32a中,经酶切鉴定后转化大肠杆菌Rosetta( DE3),于37℃、1.0 mmol/L IPTG条件下诱导表达,大肠杆菌菌体裂解产物再经SDS - PAGE和Western - blot分析.结果表明:该基因片段得到较高表达,融合蛋白的分子质量约为48 ku,主要以包涵体形式存在,且具有一定的免疫学活性.