短芽孢杆菌低温弹性蛋白酶酶学特性分析

• 作者: 巫有华 张桂英 张莉 李同祥 高兆建
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 农学
• 关键词: 短芽孢杆菌XZE116 低温弹性蛋白酶 分离纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 149-154
• 分类号: S961.6
• 字数: 4351字
• 语种: 中文

摘要

旨在从短芽孢杆菌(Bacillus brevis)XZE116发酵液中分离纯化低温弹性蛋白酶,并对酶学性质进行研究.利用硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析和SephadexG-75分子筛凝胶过滤层析等方法进行纯化.结果显示,分离纯化到了均一的酶蛋白,酶纯度提高了37.21倍,回收率为35.3％.SDS-PAGE及Sephadex G-75分子筛凝胶过滤层析显示酶蛋白为单亚基蛋白,分子量是32.6 kD.最适作用温度25℃.在pH7.5-10.5范围内酶活性及稳定性较高,最适作用pH9.0,Mg2+对酶有明显激活作用.丝氨酸蛋白酶特异性抑制剂强烈抑制酶活性,表明所纯化到的弹性蛋白酶属于丝氨酸蛋白酶.酶对阴离子表面活性剂(0.1％SDS)、阳离子表面活性剂(0.1％ CTAB)和非离子型表面活性剂(1％ Tween80)均具有很强的稳定性.鉴于短芽孢杆菌XZE116弹性蛋白酶具有以上优良酶特性,它在肉品嫩化领域具有潜在的应用价值.