皱边石杉内生真菌ISSR-PCR反应条件的优化

• 作者: 刘仲华 史云峰 朱楠楠 禹利君 胥锦桦 黄璜
• 来源期刊: 湖南农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 皱边石杉 内生真菌 内部简单重复序列 正交试验
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 园艺·园林
• 页码范围: 398-403
• 分类号: S58|Q75
• 字数: 4498字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3742/SP.J.1238.2012.00398

摘要

以从皱边石杉中分离纯化出的99株内生真菌DNA为材料,优选出10条ISSR引物(UBC842、UBC848、UBC850、UBC856、UBC861、UBC864、UBC868、UBC873、UBC880、UBC887)的最适退火温度,并对其进行ISSR-PCR反应体系单因素试验及正交试验优化,建立皱边石杉内生真菌ISSR-PCR的优化反应体系,即25μL反应体系中,10×PCR Buffer(Mg2+浓度为2.0 mmol/L)2.5 μL,dNTPs( 10 mmol/L)0.6 μL,引物(10 pmol/μL)2.0μL,Taq E(1 U/μL)1.5μL,DNA模板(10 ng/μL)3 μL,无菌ddH20 15.4 μL.以UBC873引物对99株内生真菌基因组DNA进行PCR扩增,初步获知皱边石杉内生真菌资源的遗传多样性非常丰富.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄璜	湖南农业大学农学院	278	3431	32.0	46.0
2	刘仲华		49	337	11.0	15.0
4	史云峰	湖南农业大学东方科技学院	18	144	7.0	11.0
7	禹利君		3	6	2.0	2.0
9	胥锦桦		2	6	2.0	2.0