ETEC K88菌毛蛋白抗体PPA-ELISA检测方法的建立

• 作者: 孙翠平 张娜 李书光 李峰 沈志强 肖跃强 苗立中 陈金龙
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 产肠毒素大肠埃希菌 K88 辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌A蛋白-酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 95-98
• 分类号: S852.612
• 字数: 2613字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2012.06.023

摘要

以纯化的大肠埃希菌K88菌毛蛋白为包被抗原,建立了检测大肠埃希菌K88 IgG抗体的间接ELISA方法.确定了间接ELISA的最适反应条件,即最佳抗原包被浓度为1μg/mL,兔抗体稀释倍数为1∶10,猪抗体稀释倍数为1∶100,确定最佳封闭液为50 g/L脱脂奶粉,最佳封闭时间为0.5h,血清反应时间0.5h,二抗反应时间1h,底物室温反应时间为15 min,阴阳性临界值兔血清为0.33、猪血清为0.45.证实该间接PPA-ELISA方法特异性强、重复性好、敏感度高,可以作为疫苗效力检验和流行病学调查的参考方法.