K88 ad ETEC菌毛蛋白亚基基因faeC的克隆、表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 周智爱 张大兵 梁婉琪 武爱波 潘爱虎 王玉炯 申慧峰 钱炳俊 黄亚红
• 来源期刊: 上海农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: K88 ad ETEC faeC 重组蛋白 纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 页码范围: 5-10
• 页数: 6页
• 分类号: S852.61+2|Q785|S858.28
• 字数: 4676字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3924.2005.02.002

摘要

为研究毒素源性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白分子装配机理,从K88 ad ETEC中PCR扩增出K88菌毛蛋白小亚基基因片段faeC,然后将其克隆到大肠杆菌表达载体pET-30a(+)中,获得重组质粒pET30C,并将该质粒转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中;重组菌株经IPTG诱导后,经过SDS-PAGE分析表明该菌株可以表达FaeC蛋白(16.9 kDa),且重组蛋白主要以包涵体形式存在,约占菌体蛋白的30%.用分离纯化的重组FaeC蛋白免疫小鼠,获得FaeC的鼠抗血清,经免疫学分析表明,利用此重组蛋白制备的抗血清与FaeC重组蛋白及K88 ad ETEC的菌毛蛋白都能发生特异性抗原-抗体反应.