鼠PrP的无细胞表达及其多克隆抗体的制备

• 作者: 万家余 刘文森 孟轲音 张晓晶 李忠义 李莎 栾世慧 梁斌斌 汤鑫 沈景林 郝镯 鞠传静
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 朊蛋白 无细胞表达系统 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 327-329,332
• 分类号: R392
• 字数: 2743字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2012.04.004

摘要

目的 成功的表达鼠的PrP,制备特异性的兔抗PrP多克隆抗体.方法 以BALB/c小鼠肝脏基因组DNA作为模板运用PCR技术成功扩增了PrP23-231,将其克隆到pRSET原核表达载体中,构建重组表达载体pRSET PrP23-231.将该重组载体进行无细胞表达,然后对成功表达的PrP进行纯化,然后用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔制备其多克隆抗体,并进行Western-blot鉴定.结果 通过Western-blot鉴定,有约30 kD的目的 条带,证明蛋白成功表达,并进行其多克隆抗体的制备并进行Western-blot鉴定,有约30 kD的目的 条带,证明成功制备了PrP的多克隆抗体.结论 成功表达了PrP23-231,并且成功制备了其多克隆抗体,为进一步研究PrP的功能奠定了基础.