EV71病毒P1和3CD基因共表达重组杆状病毒双顺反子穿梭载体的构建及鉴定

• 作者: 卓菲 姚相杰 蔡春林 赵洁玲 黎剑华
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肠道病毒71型 杆状病毒 类病毒颗粒 疫苗
• 年，卷（期）: 2012,（18）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2725-2727
• 分类号: R3
• 字数: 2696字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2012.18.012

摘要

目的 通过克隆EV71病毒结构前体蛋白P1和非结构蛋白3CD,构建共表达P1前体蛋白和非结构蛋白3CD的重组杆状病毒表达载体.方法 设计合成EMCV病毒IRES序列的特异性引物,克隆至含有CMV启动子的杆状病毒穿梭载体pFastBacDual-CMV上,命名为pFBCMV-IRES.从手足口病重症患者分离EV71病毒株,经RT-PCR技术分别扩增出EV71病毒的P1前体蛋白区与3CD区的片段,定向克隆至杆状病毒穿梭载体pFBCMV-IRES的IRES序列的上游和下游,随后转化到大肠杆菌DH5α中,经PCR和双酶切鉴定转化菌落.结果 通过对重组杆状病毒穿梭载体pFBCMV-IRES-P1-3CD进行酶切和DNA序列分析,证明共表达EV71病毒P1和3CD基因的重组杆状病毒双顺反子穿梭载体构建成功.结论 共表达EV71病毒P1和3CD基因重组杆状病毒双顺反子穿梭载体的成功构建,将为下一步制备EV71病毒的类病毒颗粒疫苗打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡春林	广东省深圳市罗湖区疾病预防控制中心微生物检验科	4	10	1.0	3.0
2	姚相杰	广东省深圳市疾病预防控制中心微生物检验科	11	27	2.0	5.0
3	赵洁玲	广东省深圳市罗湖区疾病预防控制中心微生物检验科	1	0	0.0	0.0
4	卓菲	广东省深圳市罗湖区疾病预防控制中心微生物检验科	6	20	3.0	4.0
5	黎剑华	广东省深圳市罗湖区疾病预防控制中心微生物检验科	3	9	1.0	3.0