环式增强型绿色荧光蛋白热稳定性及Npu DnaE内含肽高反式剪接效率研究

• 作者: 叶丙雨 张乐之 张部昌 曹诚 李德彬 王政 肖丽霞 赵志虎
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛋白环化 内含肽类 Cyc-EGFP 反式剪接 热稳定性
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 253-257,262
• 分类号: Q51
• 字数: 4238字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2012.04.004

摘要

目的 在体内借助Npu DnaE内含肽(intein)的高效反式剪接作用获得环式增强型绿色荧光蛋白(Cyc-EGFP).方法 对构建的融合表达载体pET/Npu DnaE intein/EGFP-28a( + )进行诱导、表达,之后利用亲和纯化获得高纯度的Cyc-EGFP和增强型绿色荧光蛋白(EGFP),并对二者的荧光强度和热稳定性进行比较.结果 Npu DnaE内含肽环化效率可达98%以上,明显优于Ssp DnaE内含肽,环化后的EGFP热稳定性提高了4～5℃.结论 Cyc-EGFP这一明显优势使蛋白环化在蛋白质工程等领域具有重要的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹诚	军事医学科学院生物工程研究所	112	536	10.0	19.0
2	王政	军事医学科学院生物工程研究所	58	346	10.0	15.0
3	张部昌	安徽大学生命科学学院	82	550	12.0	20.0
4	赵志虎		48	447	11.0	20.0
5	肖丽霞	军事医学科学院生物工程研究所	2	7	2.0	2.0
6	李德彬	军事医学科学院生物工程研究所	3	7	2.0	2.0
7	叶丙雨	安徽大学生命科学学院	4	3	1.0	1.0
11	张乐之	军事医学科学院生物工程研究所	1	2	1.0	1.0