葡萄根瘤蚜TaqMan-MGB实时荧光定量检测方法的研究

• 作者: 孔繁芳 武艳霞 王忠跃 郭庆
• 来源期刊: 植物保护
• 学科: 农学
• 关键词: 葡萄根瘤蚜 TaqMan-MGB 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 实验方法与技术
• 页码范围: 108-113
• 分类号: S436.631.21
• 字数: 4745字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0529-1542.2012.02.022

摘要

为建立葡萄根瘤蚜实时荧光定量PCR的检测方法,参考Karen Herbert等设计的特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,构建以标准阳性质粒作为标准品制作标准曲线,并经优化反应条件,建立葡萄根瘤蚜的实时荧光PCR绝对定量检测方法,进行敏感性和重复性试验,并对受葡萄根瘤蚜为害的葡萄根际土壤进行初步定性检测.结果表明:该方法的灵敏度可达1.625拷贝/μL,3次重复检测的变异系数均小于5％.提取0.25g含有10头葡萄根瘤蚜若虫土壤的DNA,并将其梯度稀释,用建立的荧光定量PCR进行检测,将DNA稀释103倍后,仍能检测出阳性结果.对受害葡萄根际土壤检测结果为阳性.葡萄根瘤蚜TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测技术具有特异性强,敏感性高,易操作等优点,有很好的应用前景和研究价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王忠跃	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	48	461	12.0	19.0
2	郭庆	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	13	190	7.0	13.0
3	孔繁芳	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	10	46	4.0	6.0
4	武艳霞	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	3	50	2.0	3.0