香蕉条斑病毒LAMP快速检测方法的建立

• 作者: 彭军 杨腊英 汪军 王国芬 郭立佳 黄俊生
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: 香蕉条斑病毒 环介导等温核酸扩增技术 检测
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 病原学
• 页码范围: 577-584
• 页数: 8页
• 分类号: S432.41
• 字数: 4132字
• 语种: 中文

摘要

环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification/LAMP)是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术.本研究以香蕉条斑病毒(Banana streak virus,BSV)ORF3保守区域为基础针对6个特定区域设计并筛选了4条LAMP扩增引物,通过对LAMP反应中MgSO4、dNTPs、Betaine等主要试剂浓度进行优化,建立了香蕉BSV的LAMP检测方法,63℃反应90 min后通过在反应产物中添加SYBR Green Ⅰ染料后颜色的变化,肉眼即可判断检测结果.LAMP具有极高的检测特异性和灵敏性,其检测下限约为3.2 ng·μL-1,是PCR检测灵敏度的25倍,能快速、准确地对疑似样品进行检测,本研究对华南地区部分疑似样品的检测结果显示LAMP阳性检出率比PCR检出率高.本文建立的BSV LAMP检测方法是对BSV检测方法的拓展和延伸,为香蕉病毒的快速检测提供技术保障.