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摘要:
背景:人端粒酶反转录酶是端粒酶的重要组成之一,可使端粒酶表现活性从而拮抗端粒缩短或细胞衰老.目的:构建人端粒酶反转录酶C 端936-1132 氨基真核表达载体,并在人胚肾细胞293T 表达,为其在细胞内定位研究奠定基础.方法:以人端粒酶反转录酶cDNA 为模板,PCR 扩增出带有酶切位点其 C 端 936-1132 氨基序列片段,并与真核表达载体pcDNA3.1-HisA 连接,构建出重组质粒pcDNA3.1-HisA-hTERT aa936-1132,将重组质粒转染入人胚肾细胞293T 中,使蛋白表达,并对蛋白进行免疫印迹鉴定.结果与结论:经双酶切和基因测序等方法证实,人端粒酶反转录酶C 端936-1132 氨基重组质粒pcDNA3.1-HisA-hTERTaa936-1132 构建成功,经免疫印迹鉴定可检出融合蛋白.
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文献信息
篇名 人端粒酶反转录酶936-1132氨基真核表达载体的构建及在293T细胞中表达
来源期刊 中国组织工程研究 学科 医学
关键词 人端粒酶反转录酶C 重组质粒 人胚肾细胞293T 蛋白表达 免疫印迹
年,卷(期) 2012,(11) 所属期刊栏目 技术与方法
研究方向 页码范围 1977-1980
页数 分类号 R318
字数 3808字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1673-8225.2012.11.018
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 庞建新 南方医科大学药学院 43 428 10.0 20.0
2 曹莹 南方医科大学药学院 30 85 5.0 8.0
3 卢钧雄 南方医科大学药学院 2 7 2.0 2.0
4 江慧贤 南方医科大学药学院 3 16 2.0 3.0
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人端粒酶反转录酶C
重组质粒
人胚肾细胞293T
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免疫印迹
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沈阳浑南新区10002信箱
8-584
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