中国鲎微卫星引物扩增圆尾鲎DNA的PCR反应体系优化

• 作者: 翁朝红 肖志群 莫然 谢仰杰
• 来源期刊: 集美大学学报：自然科学版
• 学科: 生物学
• 关键词: 圆尾鲎 中国鲎 微卫星引物 PCR 正交优化
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 水产科学与生物工程
• 页码范围: 89-95
• 页数: 7页
• 分类号: Q332
• 字数: 1607字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7405.2012.02.002

摘要

采用正交设计法,从dNTPs浓度、引物浓度、Mg2＋浓度、Taq DNA聚合酶用量4个因素3个水平出发,优化设计圆尾鲎DNA的PCR反应体系（引物为中国鲎微卫星引物）.并采用直观分析方法分析正交试验结果,最终建立了圆尾鲎SSR-PCR最佳反应体系：总体积20μL,Taq DNA聚合酶1.5 U、dNTPs 0.16 mmol/L、引物0.2μmol/L、Mg2＋2.0 mmol/L;并通过PCR梯度实验进一步优化模板DNA质量浓度、退火温度及退火时间,获得最佳反应条件：模板DNA质量浓度为30 ng/μL,退火温度为48℃,退火时间为20～25 s.对最佳反应体系和反应条件进行了检验,结果显示该反应体系稳定性高、重复性好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	莫然	集美大学水产学院	1	0	0.0	0.0