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摘要:
目的 利用siRNA方法沉默HepG2/ADM细胞系中BC047440基因,观察其受抑制后对细胞多药耐药性的影响及其分子机制.方法 建立BC047440蛋白在HepG2/ADM细胞系siRNA干扰模型,采用Western blot检测BC047440蛋白的表达;实验分3组:BC047440-shRNA组、control-shRNA组和HepG2/ADM组.CCK-8法分析阿霉素对细胞生长抑制率的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期分布;Western blot检测BC047440沉默后NF-κB蛋白表达的变化;Realtime PCR检测Survivin、CCNL1基因mRNA水平的变化.结果 成功建立BC047440蛋白siRNA干扰模型;NF-κB蛋白表达BC047440-shRNA组约为HepG2/ADM组67.69%,约为control-shRNA组67.39%;细胞毒性实验中24、48 h阿霉素对BC047440-shRNA组细胞毒性作用明显增强;流式细胞仪检测结果显示BC047440-shRNA组细胞凋亡明显增多,细胞周期分布多停留于G1/G0期,S期细胞明显减少.Real-time PCR检测BC047440-shRNA组Survivin基因mRNA表达约为control-shRNA组37%,约为HepG2/ADM组42%;检测BC047440-shRNA组CCNL1基因mRNA表达约为control-shRNA组3.5倍,约为HepG2/ADM组2.4倍.结论 沉默BC047440基因可通过NF-κB信号通路及其下游Survivin、CCNL1信号逆转HepG2/ADM细胞的多药耐药性,提示BC047440基因可能是形成肝癌多药耐药的重要分子之一.
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慢病毒载体
p100蛋白
HepG2细胞系
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文献信息
篇名 慢病毒介导BC047440基因沉默逆转HepG2/ADM细胞化疗耐药性机制的探讨
来源期刊 第三军医大学学报 学科 医学
关键词 BC047440 人多药耐药细胞系HepG2/ADM 核转录因子-κB Survivin CCNL1
年,卷(期) 2012,(8) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 705-709
页数 分类号 R394.2|R73-361|R735.7
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 杨彤翰 第三军医大学新桥医院肝胆外科 46 262 9.0 14.0
2 李靖 第三军医大学新桥医院肝胆外科 83 480 12.0 17.0
3 黄小兵 第三军医大学新桥医院肝胆外科 57 283 10.0 13.0
4 郑璐 第三军医大学新桥医院肝胆外科 43 235 8.0 12.0
5 王峥 第三军医大学新桥医院肝胆外科 2 4 1.0 2.0
6 粱平 第三军医大学新桥医院肝胆外科 1 4 1.0 1.0
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BC047440
人多药耐药细胞系HepG2/ADM
核转录因子-κB
Survivin
CCNL1
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第三军医大学学报
半月刊
1000-5404
50-1126/R
大16开
重庆市沙坪坝区高滩岩30号
78-91
1979
chi
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15739
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28
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