稳定表达人Fhit突变体细胞系的建立

• 作者: 于芳 绳纪坡 胡宝成
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 脆性组氨酸三联体 突变体 稳定表达细胞系
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 183-185
• 分类号: Q78|Q75
• 字数: 2464字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2012.02.008

摘要

目的:构建人脆性组氨酸三联体(Fhit)突变体真核表达载体并建立稳定表达人Fhit突变体的细胞株,以便进一步研究Fhit与复制蛋白A(RPA)在体内的相互作用.方法:将3种人Fhit突变体cDNA克隆至带有HA标签的真核表达载体pREP10上,构建人Fhit突变体真核表达载体,转染HeLa细胞,经湖霉素B加压筛选阳性克隆,用Western印迹鉴定稳定表达Fhit突变体蛋白FhitA、FhitD和FhitF的阳性细胞株.结果:经PCR鉴定及序列分析,Fhit突变体基因真核表达载体pREP10/FhitA/D/F-HA构建正确,转染人HeLa细胞,筛选出Fhit突变体表达较高的细胞株.结论:建立了3株稳定表达Fhit突变体的细胞株HeLa-FhitA/D/F,为研究Fhit与RPA的相互作用在DNA损伤应答中发挥的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	绳纪坡	军事医学科学院生物工程研究所	18	50	4.0	6.0
2	于芳	军事医学科学院生物工程研究所	27	68	5.0	7.0
3	胡宝成	军事医学科学院生物工程研究所	35	154	5.0	11.0