构建重组人SERCA2a基因9型腺相关病毒载体和病毒包装

• 作者: 侯月梅 张广伟 徐晓霞 王凌鹏 王红丽 范平 黄焰
• 来源期刊: 新疆医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 肌浆网钙ATP酶 重组腺相关病毒 包装
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 1605-1609
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 3308字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨构建重组人SERCA2a基因9型腺相关病毒载体和病毒包装的方法,并包装出rAAV9-hSERCA2a-EGFP.方法 根据细菌内同源重组的方法使用腺相关病毒包装系统,将hSERCA2a基因克隆到腺相关病毒载体中,与腺相关病毒包装质粒pAAV pHelper发生重组,通过脂质体共转染人胚肾293(HEK293)细胞,产生重组腺相关病毒,通过酶切鉴定和DNA测序鉴定正确后进行扩增、纯化和滴度测定(采用荧光滴度检测法).结果 酶切鉴定和DNA测序证明重组腺相关病毒载体rAAV9-hSERCA2a-EGFP构建成功,PCR鉴定可见到阳性扩增条带,rAAV9-hSERCA2a-EGFP滴度高达1×1012 vg(virus genomes,vg)/mL.结论 本方法成功构建和包装滴度为1×1012 vg/mL携带hSERCA2a基因的rAAV9-hSERCA2a-EGFP.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄焰	新疆医科大学第一附属医院心律失常实验室	13	22	3.0	3.0
2	王凌鹏	新疆医科大学第一附属医院心律失常实验室	21	95	6.0	8.0
3	范平	新疆医科大学第一附属医院心律失常实验室	20	87	6.0	8.0
4	王红丽	新疆医科大学第一附属医院心律失常实验室	18	37	4.0	5.0
5	张广伟	新疆医科大学第一附属医院心律失常实验室	5	12	2.0	3.0
6	徐晓霞	新疆医科大学第一附属医院心律失常实验室	4	18	2.0	4.0